基因魔剪”让癌症建模更准确高效
发布时间:2019-04-17 21:36来源: 未知据开放获取期刊《基因组医学》16日公开的一项研讨,美国科学家报告了一种创立癌症小鼠模子的新法子——利用有“基因魔剪”之称的CRISPR/Cas9系统神速将癌症关系基因敲入小鼠的DNA中。该方式以漫山遍野的高效,满足了快捷切确建设植物模型的须要。
研究通信作者、麻省大学医学院RNA疗法研讨所的王文说:“现有用来敲入致癌基因以创立癌症模子的门径要末屈就很低,要么难以管教敲入地位和敲入的拷贝数。CRISPR/Cas9使得在方针基因座插入大片段DNA成为可能,况且可使用于执行室的人类细胞以及小鼠中。咱们研发出了一个新的细碎——CRISPR-SONIC,可以在肝癌小鼠模型中活络进行基因敲入,且精确率很高。”
CRISPR/Cas9零碎由一段率领RNA与Cas9酶构成。为了将致癌基因插入活小鼠的基因组,团队使用了具备2个统率RNA的CRISPR/Cas9,进行了一个三步调的操纵。起首,个中一个导游RNA和Cas9酶一块儿对指数DNA位置进行切割;第二步,另外一个导游RNA和Cas9会对一个DNA环(即质粒供体)进行切割;第三步则是将曾经被切割成线状的质粒环插入指数位置。
该办法在执行室细胞中取得成功考验,也在小鼠身上完成为了测试。团队考察到在使用了CRISPR-SONIC后,样板中约有10%的肝脏细胞获胜带上了绿色荧光蛋白(GFP)。这绝对于之前那些门径兴许0.5%的敲入性能来说,是一个弘大的选拔。
该妙技亦可用于竖立生物发光癌症模型,让研讨者们实时监测癌细胞的成长和癌症发展。(记者张梦然)